Imerzní olej potřebujete ve chvíli, kdy chcete s mikroskopem pozorovat při zvětšení kolem 1000× pomocí objektivu 100×. Bez oleje zůstane obraz při tomto zvětšení mlhavý a tmavý, i když zaostříte sebepečlivěji.
Imerzní olej je čirá kapalina, kterou kápnete na krycí sklíčko preparátu a ponoříte do ní přední čočku imerzního objektivu. Objektiv tak zachytí víc světla a ukáže jemné detaily, které bez oleje nerozlišíte. Typicky jde o bakterie, krevní buňky nebo jemnou stavbu buněk.
Čtení: 7 minPostup: 2 minutyAktualizováno:
Krátká odpověď
Imerzní olej vyplní vzduchovou mezeru mezi krycím sklíčkem a objektivem 100× s nápisem Oil. Do objektivu tak projde víc světla a obraz při zvětšení kolem 1000× je ostrý. Postup: zaostřete při 40×, revolver pootočte do poloviny, kápněte jednu malou kapku, zacvakněte objektiv 100× a doostřete jen jemným šroubem. Po práci objektiv hned očistěte papírem na optiku.
K čemu slouží imerzní olej
Světlo, které projde preparátem, musí na cestě do objektivu přejít z krycího sklíčka do vzduchu. Sklo a vzduch lámou světlo velmi rozdílně. Index lomu skla je přibližně 1,52, vzduchu 1,0. Šikmé paprsky se proto na tomto rozhraní odkloní nebo odrazí a do objektivu se vůbec nedostanou. Právě ony přitom nesou informaci o nejjemnějších detailech.
Imerzní olej má index lomu téměř stejný jako sklo, u běžných olejů 1,515 až 1,518. Když vyplní mezeru mezi krycím sklíčkem a objektivem, světlo projde bez lomu a objektiv ho zachytí víc. Zvýší se tím numerická apertura (NA) objektivu, a s ní rozlišení i jas obrazu.
Rozdíl je znát i v číslech. Suché objektivy, které pracují ve vzduchu, prakticky nepřekročí NA 0,95. Imerzní objektivy dosahují až 1,4. Běžný imerzní objektiv 100× u školních a laboratorních mikroskopů má NA 1,25.
Který objektiv imerzní olej potřebuje
Imerzní objektiv poznáte podle popisu na tubusu. Nejčastěji je na něm nápis Oil, u některých výrobců také Oel, HI nebo Imm. Typické označení vypadá takto: 100/1.25 Oil. Číslo za lomítkem je numerická apertura.
Barevné proužky se u výrobců liší. Objektiv 100× má často bílý proužek, který označuje zvětšení. Některé imerzní objektivy mají navíc úzký černý proužek, kterým se podle normy označuje olejová imerze, jiné ho nemají a některé nemají barevný proužek vůbec. Spolehlivým znakem imerzního objektivu je proto vždy nápis Oil.
V popisu mikroskopu najdete imerzní objektiv uvedený například jako „100xs (imerzní)“ nebo „100x (olejová imerze)“. Písmeno s znamená, že objektiv je odpružený. Když se přední čočkou dotkne sklíčka, pružina se zasune a část nárazu zachytí.
Objektivy 4×, 10× a běžný 40× jsou suché a olej na ně nepatří. Existují i imerzní objektivy 40× nebo 60×, ty ale mají označení Oil vždy na tubusu a u školních mikroskopů se prakticky nevyskytují. Pokud je nejsilnějším objektivem vašeho mikroskopu 40×, imerzní olej nepotřebujete.
Co budete potřebovat
- mikroskop s imerzním objektivem 100×,
- preparát na podložním sklíčku, živé a mokré vzorky vždy přikryté krycím sklíčkem,
- imerzní olej určený pro mikroskopy,
- papír na optiku a případně čisticí prostředek, který doporučuje návod k mikroskopu.
Lahvička imerzního oleje bývá součástí balení mikroskopů s imerzním objektivem. Najdete ji například u Levenhuk MED 10M nebo Levenhuk 700M. Když olej dojde, doplníte ho samostatně, třeba jako Bresser imerzní olej 5 ml (nD = 1,515).
Jak používat imerzní olej krok za krokem
- Zaostřete při menším zvětšení. Začněte objektivem 4× nebo 10×. Najděte místo, které chcete pozorovat, posuňte ho do středu zorného pole, pak přepněte na 40× a doostřete.
- Přidejte světlo. Při zvětšení 1000× je potřeba víc světla než při 400×. Zvyšte jas osvětlení, kondenzor nastavte do horní polohy a clonu kondenzoru otevřete víc, pokud ji mikroskop má.
- Otočte revolverem jen do poloviny. Objektiv 40× odsuňte stranou, ale 100× ještě nezacvakněte. Nad preparátem tak nebude žádný objektiv a vznikne místo pro kapku. Ostřením přitom nehýbejte.
- Kápněte jednu malou kapku oleje. Kapka patří na krycí sklíčko přesně tam, kudy prochází světlo. Hrdlem lahvičky se sklíčka nedotýkejte a lahvičkou předtím netřepejte, aby v oleji nevznikly bublinky.
- Dotočte revolver na objektiv 100×. Ostřením ani stolkem přitom nehýbejte. Objektiv 100× je navržený tak, aby po přepnutí skončil jen asi 0,1 až 0,2 mm nad krycím sklíčkem. Při otáčení revolveru proto sám vjede bokem do kapky. Ze strany uvidíte, jak olej vyplní mezeru mezi sklíčkem a objektivem.
- Doostřete jen jemným šroubem. Pokud byl obraz při 40× ostrý, stačí u většiny mikroskopů malé pootočení, protože objektivy jsou na sebe sladěné. Hrubým šroubem při 100× nehýbejte, objektiv by mohl prorazit krycí sklíčko.
- Zkontrolujte bublinky. Když je obraz mlhavý nebo se vlní, je v oleji nejspíš vzduchová bublinka. Zkuste revolverem lehce pohnout tam a zpět. Pokud to nepomůže, olej setřete a kápněte novou kapku.
Když objektiv 100× při otáčení zavadí o sklíčko
U některých mikroskopů nejsou objektivy na sebe přesně sladěné a objektiv 100× by se při otáčení revolveru o sklíčko zachytil. V tom případě stolek nejprve trochu spusťte, kápněte olej a zacvakněte objektiv 100×. Pak se dívejte ze strany, ne do okuláru, a stolek pomalu zvedejte, dokud se přední čočka neponoří do kapky a nebude téměř u sklíčka. Teprve potom se podívejte do okuláru a jemným šroubem stolek pomalu spouštějte, až obraz zaostříte.
Jak se vrátit k menšímu zvětšení
Na sklíčku teď zůstává olej. Objektiv 40× je při ostření velmi blízko sklíčka a při přetočení revolveru by projel olejem. Ze 100× proto přejděte rovnou na 10× nebo 4×, které jsou od sklíčka dál. Pokud znovu potřebujete 40×, preparát nejprve očistěte nebo vložte nový.
Nejčastější chyby začátečníků
- Příliš velká kapka. Přebytečný olej steče ze sklíčka na stolek nebo na kondenzor. Stačí jedna malá kapka.
- Návrat ze 100× na 40× přes olej. Objektiv 40× je suchý a olej na čočce mu obraz rozmaže. Pokud se to stane, očistěte ho hned.
- Ostření hrubým šroubem při 100×. Objektiv je jen kousek nad sklíčkem a stačí malé pootočení, aby do něj narazil.
- Jiný olej místo imerzního. Kuchyňský olej, parafínový olej ani glycerin nemají správný index lomu a obraz nezlepší. Nemíchejte ani imerzní oleje od různých výrobců.
- Olej ponechaný na objektivu. Chytá prach a při dalším použití se snadno dostane i na jiné objektivy.
- Obyčejný papírový ubrousek. Pouští vlákna a může poškrábat vrstvy na čočce. Používejte papír na optiku.
Jak objektiv po použití vyčistit
Objektiv čistěte hned po skončení práce. Moderní syntetické imerzní oleje rychle nezasychají, ale olej nechaný na čočce chytá prach a časem se roztírá i tam, kam nepatří.
- Vytočte objektiv 100× ze sklíčka a vyjměte preparát.
- Přední čočku objektivu otřete suchým papírem na optiku. Netlačte a nedrhněte, papír jen lehce přiložte a táhněte jedním směrem. Opakujte s čistým kouskem papíru, dokud na něm zůstávají stopy oleje.
- Pokud na čočce zůstane mastný film, navlhčete papír malým množstvím prostředku, který doporučuje návod k vašemu mikroskopu. Obvykle jde o čistý líh. Kapalinu nikdy nelijte přímo na objektiv a bez doporučení výrobce nepoužívejte aceton ani ředidla.
- Otřete také preparát a podle potřeby stolek a kondenzor. Lahvičku s olejem pevně zavřete, aby se do ní nedostal prach.
Rychlé shrnutí
- Imerzní olej patří jen na objektiv s nápisem Oil, obvykle 100×.
- Zvyšuje rozlišení a jas obrazu, protože světlo projde z krycího sklíčka do objektivu bez lomu.
- Nejprve zaostřete při 40×, revolver otočte do poloviny, kápněte jednu kapku a teprve potom zacvakněte 100×.
- Při 100× ostřete jen jemným šroubem a zpět na 40× přes olej nepřecházejte.
- Po práci objektiv hned očistěte papírem na optiku.
Časté otázky
K čemu slouží imerzní olej?
Vyplní prostor mezi krycím sklíčkem a objektivem 100×. Protože má stejný index lomu jako sklo, dostane se do objektivu víc světla z preparátu. Obraz je při zvětšení kolem 1000× ostřejší, jasnější a ukáže jemnější detaily.
Můžu použít imerzní olej na objektiv 40×?
Na běžný 40× objektiv ne. Je určený pro práci ve vzduchu a olej by obraz zhoršil. Olej používejte jen s objektivy, které mají na tubusu nápis Oil.
Čím můžu imerzní olej nahradit?
Běžně dostupnou náhradu nedoporučujeme. Kuchyňský nebo parafínový olej má jiný index lomu a obraz nezlepší. Dříve se používal cedrový olej, dnes se používají syntetické imerzní oleje určené pro mikroskopy.
Kolik oleje mám použít?
Stačí jedna malá kapka. Větší množství obraz nezlepší a olej pak steče ze sklíčka.
Musí mít preparát krycí sklíčko?
Živé a mokré preparáty ano, olej se kape na krycí sklíčko. V laboratořích se barvené a vysušené nátěry, například krve nebo bakterií, pozorují i bez krycího sklíčka a olej se kápne přímo na nátěr.
Je imerzní olej v balení mikroskopu?
U mikroskopů s imerzním objektivem 100× obvykle ano. Obsah balení najdete u každého mikroskopu v popisu produktu, například u Levenhuk MED 10M je lahvička s imerzním olejem uvedená v obsahu balení.
Co když olej na objektivu zůstal několik dní?
Postupujte stejně jako při běžném čištění. Nejprve setřete olej suchým papírem na optiku, zbytky pak papírem lehce navlhčeným prostředkem z návodu. Čočku nedrhněte a nic na ni netlačte.